Ako prejsť testom PCR v gynekológii. Metóda PCR v gynekológii. PCR diagnostika vnútromaternicových infekcií. Nebezpečenstvo vnútromaternicovej infekcie a spôsoby jej odstránenia

Tehotenstvo

V gynekológii sa na vykonanie určitých štúdií používa široká škála metód, z ktorých jednou je náter PCR (PCR - polymerázová reťazová reakcia). Náter je testovacia metóda, ktorou lekár berie veľké množstvo biologický materiál z povrchu sliznice. Táto metóda umožňuje odhaliť v tele rôzne infekcie, ktoré sa najskôr nijako nesignalizujú.

Ako pochopiť výsledky štúdie?

Genitálna tuberkulóza je jednou z hlavných príčin vážna choroba trubice vedúce k neplodnosti. Bežné laboratórne hodnoty majú č veľký význam v diagnóze. Absolútnu diagnózu nemožno urobiť charakteristické znaky hysterosalpingogram alebo laparoskopia.

Táto štúdia zahŕňala 72 neplodných žien, ktoré splnili kritériá zaradenia a vylúčenia. Špecifické diagnostické testy boli hodnotené podľa tohto diagnostického kritéria. Zhoda výsledkov medzi klinickými kritériami a špecifickými diagnostickými testami bola analyzovaná podľa Kappa konvencie.

Tento typ analýzy sa vykonáva v cervikálnom kanáli alebo vaginálnej sliznici. PCR náter môže odhaliť infekčné agens alebo choroby na základe ich DNA genetického materiálu.

Ako prebieha analýza PCR?

Pocínovaný náter sa umiestni do špeciálneho reaktora, v tomto biologickom materiáli môžu byť prítomné určité časti DNA infekčného agens. Do odobratej vzorky sa pridávajú špeciálne enzýmy, ktoré sú schopné naviazať sa na DNA mikroorganizmu a tiež obnoviť jeho kópiu. Táto reakcia prebieha na reťazovom princípe a po niekoľkých cykloch jej opakovania sa vytvorí dostatočný počet kópií, ktoré je možné porovnať s informáciami dostupnými v databáze o DNA mikroorganizmov. Náter PCR odobratý ženám tiež umožňuje určiť počet mikróbov, ktoré sú prítomné v ženskom tele.

Ako absolvovať testy

Tuberkulóza je chronické infekčné ochorenie a chorobnosť spojená s týmto ochorením má vážne zdravotné dôsledky. Ochorenie je rozšírené po celom svete a rozvojové krajiny výskyt je vysoký. Ochorenie často zostáva tiché alebo sa môže prejaviť nešpecifickými príznakmi. V dôsledku toho je prevalencia genitálnej tuberkulózy značne podceňovaná.

Vysoké podozrenie spôsobené intenzívnym vyšetrovaním je nevyhnutné pre diagnostiku ochorenia. Bežné laboratórne hodnoty majú malú hodnotu. Hoci z charakteristických znakov hysterosalpingogramu alebo laparoskopie nemožno urobiť absolútnu diagnózu, laparoskopia je cenným postupom na získanie tkaniva na kultiváciu a histopatologické vyšetrenie.

Táto technika pomáha presne vybrať metódu liečby, ako aj sledovať jej účinnosť.

Aké infekcie možno zistiť pomocou PCR náteru?

V organizme sa môže nachádzať veľké množstvo infekčných agens, sem patria aj „skryté“, ktoré dlho neukazujú sa.

Analýza PCR náteru odhaľuje nasledujúce infekcie:

Ako prebieha analýza PCR?

Definitívna diagnóza môže byť stanovená pozitívnou kultiváciou mykobaktérií a preukázaním špecifickej histopatologickej lézie vo vzorke. AT posledné roky Metóda polymerázovej reťazovej reakcie sa vyvinula ako užitočná a rýchla metóda na diagnostiku pľúcnej a extrapulmonárnej tuberkulózy.

Táto štúdia bola vykonaná vo Výskumnom centre plodnosti Ústavu pôrodníctva a gynekológie v Chennai v spolupráci s Centrom pre výskum tuberkulózy v Chennai a zahŕňala 72 neplodných žien, ktoré boli zaradené na 30 mesiacov. Pre štúdiu sa získal súhlas etickej komisie a od každého pacienta sa získal informovaný súhlas.

chlamýdie genitálneho traktu;
hepatitída;
ureplazmóza pohlavných orgánov;
kandidóza (drozd);
mykoplazmóza;
bakteriálna vaginóza;
Infekčná mononukleóza;
trichomoniáza;
vírusová infekcia papilómu;
herpes;
AIDS (HIV);
prítomnosť rakovinových buniek;
posúdiť hormonálny stav;

Ako sa robí ster u žien?

Na odber steru na PCR sa používajú rôzne biologické materiály (môže to byť krv, sliny, sekréty z pohlavných orgánov, moč). V laboratóriu sa ženám odoberá ster z pošvovej mikroflóry, krčka maternice alebo maternice. Tampón sa odoberie:

Odber vzoriek sa uskutočňoval pohodlnou metódou odberu vzoriek. Počas laparoskopie sa objavili príznaky naznačujúce tuberkulózu, ako sú otvorené tuberkulózy, kazeíny, granulómy a guľôčkové trubice. Skúmali sa aj dôkazy o minulej chronickej infekcii vo forme zhrubnutých skúmaviek, intraluminálnej kazeinizácie a terminálneho hydrosalpinxu s replikami skúmaviek, tubo-ovariálnej hmoty a falošných adhézií v Douglasovom vačku.

Materiál na štúdiu sa odoberal z predmenštruačného endometria a ak to bolo možné, pri laparoskopii sa odsal aj Douglasov vak. V 23 zo 72 prípadov bolo možné vykonať iba ster, kultiváciu a histopatologické vyšetrenie. Preto boli výsledky špecifických testov hodnotené podľa klinických kritérií len v týchto 49 prípadoch.

u žien, ktoré mali nechránený sex,
ktorí nikdy neboli vyšetrení
u žien, ktoré plánujú otehotnieť.

Indikácie pre PCR náter sú nasledovné:

identifikácia príčin neplodnosti;
prítomnosť STI v akútnej fáze;
ťažké tehotenstvo;
predpoklad, že STI sa stávajú chronickými;
v prípade, keď je potrebné identifikovať rezistenciu vírusu na určitý typ antibiotík.

K odobratému materiálu sa pridajú potrebné činidlá, po ktorých sa identifikujú patogény alebo choroba. Procedúra odberu materiálu netrvá dlhšie ako 5 minút, je absolútne bezbolestná a jej výsledok je možné zistiť po 2-4 dni. Podľa jej výsledkov je predpísaná liečba.

Ako sa robí ster u žien?

Prítomnosť kazeínových granulómov obklopených epiteloidnými bunkami, lymfocytmi, plazmatickými bunkami a obrovskými bunkami bola diagnostikou tuberkulózy. Na kultiváciu bola vzorka tkaniva jemne rozomletá s 5 ml sterilnej destilovanej vody. Vzorka sa odstredila a supernatant sa zlikvidoval.

Metóda polymerázovej reťazovej reakcie. Pacienti boli vo veku 20 až 35 rokov. Menštruačné nepravidelnosti ako sekundárna amenorea, oligomenorea a menorágia boli pozorované v 18 prípadoch. V 42 prípadoch okrem neplodnosti neboli žiadne iné príznaky. Tri zo 72 prípadov mali v anamnéze úzky kontakt s pacientmi s TBC. Pozitívny tuberkulínový test bol pozorovaný v 10 prípadoch s priemernou hodnotou 13 mm. V týchto 10 prípadoch sa v deviatich prípadoch preukázala tuberkulóza.

Čo potrebuje žena vedieť pred odberom PCR náteru?

Pred vykonaním štúdie sa žena musí pripraviť. Už mesiac pred plánovanou analýzou je potrebné prestať používať všetky lieky a lekárskych procedúr.

Stojí za zváženie, že analýza sa vykonáva pred menštruáciou alebo 1-4 dni po jej skončení. 3-4 dni pred analýzou je potrebné zdržať sa intímnych vzťahov. Materiály sa zvyčajne odoberajú v situáciách, keď vírus prechádza do akútneho štádia.

Dôkaz kalcifikácie ultrazvukom alebo röntgenom brucha bol pozorovaný u piatich žien. Hysterosalpingogram bol vykonaný v 59 prípadoch. Charakteristikačo naznačuje genitálnu tuberkulózu, ako je deformovaná dutina endometria, guľôčky vzhľad skúmavky, hydrosalpinx v tvare retorty, kalcifikované oblasti a kukuričné bloky boli pozorované u 35. Laparoskopia bola vykonaná u všetkých 72 pacientov a výsledky poukazovali na tuberkulózu u 43.

Pri histopatologickom vyšetrení bolo päť zo 72 vzoriek endometria pozitívnych na tuberkulózu. Z týchto piatich bolo pozitívnych konvenčnými metódami, jeden bol pozitívny iba kultivačne, dvaja iba histologicky a iba dvaja pacienti boli histologicky aj kultivačne pozitívni.

Charakteristické vlastnosti analýzy PCR:

vysoká presnosť určenia typu infekcie;
na identifikáciu patogénu stačí aj 1 jeho bunka;
schopnosť identifikovať patogén v akomkoľvek kvapalnom médiu;
dostatočne vysoká rýchlosť určovania výsledkov;
umožňuje identifikovať vírus a nie jeho odpadové produkty alebo protilátky;
metóda, ktorá presne odhalí určité typy infekcií.

V porovnaní s inými výskumnými metódami táto technika poskytuje oveľa menej falošne negatívnych výsledkov (ukazuje, že neexistuje žiadna infekcia, zatiaľ čo v skutočnosti je prítomná) a s presnosťou 99,9% nedáva falošné - pozitívne výsledky(prítomnosť infekcie, keď nie je prítomná)

Na základe diagnostických kritérií vyvinutých v tejto štúdii sa 49 prípadov rozdelilo do dvoch skupín a vyhodnotili sa diagnostické testy. Skupina A pozostávala z 28 prípadov, v ktorých bolo podozrenie na genitálnu tuberkulózu. V skupine A boli dve kultúrne pozitívne. Kultúrna citlivosť bola 14 percent a špecificita bola 100 percent. Došlo k zhode medzi klinickými kritériami a kultúrou v zmysle dohody Kappa. V týchto dvoch prípadoch boli vzorky opätovne testované a bola potvrdená pozitivita.

Ako pochopiť výsledky štúdie?

PCR náter môže byť negatívny alebo pozitívny.

Pozitívny výsledok naznačuje, že v odobratom biologickom materiáli sú stopy infekcie a ktoré z nich boli stiahnuté.

Negatívny výsledok má opačný význam a znamená, že počas štúdie sa v materiáli nenašli žiadne stopy infekcie.

Opätovné testovanie sa uskutočnilo na 5 z 12 negatívnych vzoriek a všetky boli negatívne. Prevzorkovanie je možné len v troch a všetky boli označené ako negatívne. V 3% prípadov okrem neplodnosti neboli žiadne iné príznaky. Podobné pozorovania urobili aj iní autori.

Menštruačné poruchy ako sekundárna amenorea, oligomenorea a menorágia boli pozorované v 25 % prípadov. Ale kvôli sekundárnej povahe genitálnej tuberkulózy je počet infikujúcich organizmov vzácny, miesto odberu nemusí predstavovať infikovanú oblasť a infikované miesto možno ľahko prehliadnuť. V 50% prípadov môže byť infekcia obmedzená na vajíčkovod. Navyše v dôsledku cyklickej proliferácie endometria nemajú granulómy dostatok času na vytvorenie, takže endometrium nemusí vykazovať známky tuberkulózy vo všetkých cykloch.

PCR náter a tehotenstvo

Ak sa tak stalo tento druh analýza nastávajúca matka nebolo potrebné ho užívať, potom sa už odoberá tehotnej žene, keďže táto štúdia pomáha identifikovať skryté infekcie, ktoré môžu byť sexuálne prenosné, ako aj iné skryté infekcie, ktoré sa dlho neprejavujú. Môžu skutočne poškodiť dieťa alebo viesť k potratu, vnútromaternicovým infekciám alebo predčasnému pôrodu. Preto je lepšie urobiť tento rozbor pred tehotenstvom, počas jeho plánovania, aby ste nepoškodili dieťa. Ak sa však ukáže, že žena je už tehotná, nemali by ste sa báť urobiť test, pretože to neovplyvňuje dieťa. Všetky materiály sa odoberajú z povrchu krčka maternice alebo cervikálneho kanála.

Bioptická vzorka môže byť malá a prietok krvi môže byť slabý. Z týchto dôvodov je potrebné zozbierať viacero vzoriek z viacerých zdrojov, aby sa zabezpečil maximálny výnos. Bolo navrhnuté, že histológia a bakteriológia sa navzájom dopĺňajú a ani jedna nie je úplne spoľahlivá. Zhoda medzi výsledkami týchto dvoch primérov sa teda dosiahla v 71 % prípadov.

Nebezpečenstvo vnútromaternicovej infekcie a spôsoby jej odstránenia

Vysoká falošne negatívna je v tejto štúdii dôležitým obmedzením. Harrisonove princípy internej medicíny. 17. vyd. Moderné anatomické a klinické aspekty genitálnej tuberkulózy u žien. Tuberkulóza ženských pohlavných orgánov a následná neplodnosť. Tuberkulóza ženských pohlavných orgánov v Etiópii. Tuberkulóza ženského pohlavného traktu u pacientov navštevujúcich kliniku neplodnosti.

Ak chcete zobraziť, povoľte JavaScript

PCR náter u žien, čo to je, prečo sa užíva a podľa akých pravidiel? Táto štúdia vám umožňuje veľmi presne identifikovať pôvodcov rôznych infekcií a vinníkov. zápalové procesy(vulvovaginitída). PCR analýza sa odoberá od tých, ktoré sú sexuálne aktívne a nikdy neboli vyšetrené, plánujú tehotenstvo, ktoré mali nechránený sex, ženy aj muži robia ster.

Izolácia mykobaktérií z prípadov neplodnosti u žien. Miesto laparoskopie pri tuberkulóze panvy u neplodných žien. Genitálna tuberkulóza na endokrinnej klinike. Tuberkulóza ženských pohlavných orgánov. Mantoux test na diagnostiku genitálnej tuberkulózy u žien.

Táto správa však iba skontrolovala obmedzené termíny životné prostredie. Použitie špičky pipety s aerosólovou bariérou je nevyhnutné, aby sa zabránilo krížovej kontaminácii, ako aj prenosovej kontaminácii. Preto môže manipulácia s týmito zrazeninami vyžadovať dohady, najmä počas premývania zrazenín. Niektoré komerčne dostupné extrakčné a purifikačné súpravy založené na purifikačnom protokole na pevnej fáze sú uvedené v tabuľke 1.

Polymerázová reťazová reakcia, takto sa dešifruje PCR, umožňuje nájsť genetickú informáciu infekčného agens v malom množstve materiálu odobratého na analýzu. Najbežnejší je PCR náter na STI (chlamýdie, ureaplazma, mykoplazma), mimochodom, tieto isté infekcie sú klasifikované ako "skryté", ktoré nedávajú zjavné príznaky a nie sú detekované počas bežných rutinných štúdií. Často sa diagnostikujú herpetické infekcie, ako aj rôzne typy infekcie ľudským papilomavírusom. V čom Osobitná pozornosť sa podáva tým typom, ktoré spôsobujú rakovinu krčka maternice, teda onkogénne.

Tieto súpravy eliminujú nielen dohady, ale aj časovo náročné kroky extrakcie fenol-chloroformu. Toto sa zvyčajne interpretuje tak, že jeden alebo oba oligonukleotidové ampliméry nepracujú správne s cieľovým templátom. Tento detekčný protokol tiež poskytuje vyššiu citlivosť ako metóda detekcie etídiumbromidom, ale vyžaduje dodatočné blotovanie a hybridizačné kroky. Existujú dva typy analýz pomocou meraní v reálnom čase a koncových bodov. Táto metóda bez gélu má niekoľko ďalších výhod oproti konvenčným metódam agarózového gélu.

Od nastávajúcich matiek sa odoberá PCR náter na chlamýdie a iné infekcie, ak ho neodobrali počas plánovania dieťaťa. Táto štúdia je absolútne nevyhnutná, pretože latentné sexuálne prenosné infekcie môžu „sedieť“ v tele mnoho rokov bez toho, aby sa akýmkoľvek spôsobom prejavili, ale veľmi poškodia nenarodené dieťa, môžu viesť k potratu, predčasnému pôrodu a v dôsledku toho, smrť plodu. Samozrejme, je lepšie vykonávať liečbu v štádiu plánovania dieťaťa, ale ak ich diagnostika infekcií PCR odhalila po počatí, nezáleží na tom, existujú moderné bezpečné lieky, ktoré môžu budúce matky užívať.

Čo ukazuje analýza PCR?

Tento systém môže napríklad výrazne zvýšiť priepustnosť. Analýza fluorescenčnou sondou sa vykonáva v 96-jamkovom formáte a mnohé z analytických krokov sú automatizované. Test je uzavretý systém, v ktorom sa reakčná skúmavka po amplifikácii nikdy neotvorí.

Séroepidemologicky sa preukázalo, že 50 až 80 % dospelej populácie je vystavených tomuto patogénu. Neexistovali však žiadne konzistentné výsledky so špecifickými patogénmi. Či je použitý protokol dostatočne citlivý alebo nie, preto nemožno posúdiť z dôvodu nedostatku informácií v takýchto správach.

Mnoho žien sa bojí podstúpiť testy, pretože počuli a čítali dosť, že akékoľvek manipulácie „tam“ zo strany lekára môžu. A ešte viac, nemôžete urobiť PCR náter počas tehotenstva, pretože materiál sa odoberá z krčka maternice, a nie z jeho povrchu. Ale nie je to strašidelné. Dĺžka krčka maternice je pomerne veľká. Nástroj nevstúpi do maternice, nijako neovplyvní dieťa. A nie je potrebné rozširovať krk, aby ste vzali biomateriál. bezpečné pre matku a dieťa a bezbolestné.

Niektoré chronické zápalové ochorenia, ktoré ešte nie sú definitívne zaradené medzi autoimunitné ochorenia, sa tiež považujú za súvisiace s určitými mikrobiálnymi infekciami. Avšak, na rozdiel od infekčných chorôb, potenciálne alebo prispievajúce mikróby pre takéto chronické zápalové ochorenia, vrátane autoimunitných ochorení, nie je možné ľahko zistiť vo vzorkách získaných z konkrétnej lézie. Aj za takýchto okolností by pri diagnostike a budúcej terapii mala byť dôsledná detekcia baktérií vo vzorkách rozhodujúca.

Táto štúdia sa robí nielen na detekciu pohlavne prenosných infekcií, ale aj pôvodcov bakteriálnej vaginózy a kandidózy - gardnerella a huby rodu Candida. Takže dešifrovanie náteru na diagnostiku PCR môže byť užitočné v takýchto „banálnych“ prípadoch.

Aby bolo možné získať presný výsledok analýzy, niekoľko jednoduché pravidlá pred jeho odovzdaním. Príprava na PCR náter je veľmi jednoduchá.
1. 3 hodiny pred testom nemôžete močiť.
2. Štúdia sa uskutočňuje mimo používania antibiotík a antibakteriálnych látok.
3. Je lepšie urobiť si ster v strede cyklu, ale nie tesne pred začiatkom menštruácie alebo hneď po dokončení.
4. 2-3 dni pred štúdiom neužívajte lokálne antikoncepčné prostriedky a vaginálne prípravky.
5. Niekoľko hodín pred rozmazaním sa nemôžete umývať a sprchovať.
6. sexuálny život by sa mala zastaviť najmenej 1,5 dňa pred užitím materiálu.
7. Podanie steru by sa malo mierne odložiť, ak sa deň predtým odobrali kolposkopické vzorky na zistenie chorôb krčka maternice.

Skleróza multiplex: variácie na tému. Wertheim-van Dillen a J. Van der Nordaa. Rýchla a jednoduchá metóda na čistenie nukleových kyselín. Spracovanie dlhodobých archívnych sterov z krčka maternice na detekciu ľudského papilomavírusu pomocou polymerázovej reťazovej reakcie.

Štandardizácia testov na chlamýdiovú pneumóniu: odporúčania Centra pre kontrolu a prevenciu chorôb a Laboratórneho centra pre kontrolu chorôb. Závislosť protokolov inaktivácie produktu polymerázovej reťazovej reakcie od dĺžky a zloženia amplikónu.

K tejto práci prispel rovnakou mierou. Pozadie. Patofyziológia ženskej genitálnej schistosomiázy je pochopená len čiastočne. Výsledky. Pieskové škvrny a gumové papuly sa našli u 41 zo 118 žien. Gumové papuly odrážajú intenzívnu bunkovú imunitnú odpoveď, ktorej dominujú eozinofily, epiteliálna erózia a životaschopné vajíčko. Došlo k významnému poklesu prevalencie gumovitých papúl s vekom, dokonca aj po úprave na produkciu moču z vajec. Pieskové škvrny so zrnkami vykazovali miernu bunkovú imunitnú odpoveď a vajíčko.