Cum să treci un test PCR în ginecologie. Metoda PCR în ginecologie. Diagnosticul PCR al infecțiilor intrauterine. Pericolul infecției intrauterine și modalități de a o elimina

În ginecologie, pentru a face anumite studii, se utilizează o mare varietate de metode, dintre care una este un frotiu PCR (PCR - polimerază în lanț). Un frotiu este o metodă de testare prin care medicul ia un numar mare de material biologic de pe suprafața mucoasei. Această metodă face posibilă detectarea diferitelor infecții în organism, care la început nu se semnalează în niciun fel.

Cum să înțelegeți rezultatele studiului?

Tuberculoza genitală este una dintre cauzele principale boala grava tuburi care duc la infertilitate. Valorile obișnuite de laborator au nr de mare importantaîn diagnostic. Nu se poate face un diagnostic absolut trasaturi caracteristice histerosalpingogramă sau laparoscopie.

Acest studiu a inclus 72 de femei infertile care au îndeplinit criteriile de includere și excludere. Testele de diagnosticare specifice au fost evaluate pe baza acestui criteriu de diagnostic. Acordul rezultatelor între criteriile clinice și testele de diagnostic specifice a fost analizat prin convenția Kappa.

Acest tip de analiză se efectuează în canalul cervical sau mucoasa vaginală. Un frotiu PCR poate detecta agenți infecțioși sau boli pe baza materialului lor genetic ADN.

Cum se efectuează analiza PCR?

Un frotiu conservat este plasat într-un reactor special; anumite părți ale ADN-ului agentului infecțios pot fi prezente în acest material biologic. La proba prelevată se adaugă enzime speciale, care sunt capabile să se lege de ADN-ul microorganismului și, de asemenea, să reînnoiască copia acestuia. Această reacție decurge conform principiului în lanț și după mai multe cicluri de repetare se formează un număr suficient de copii care pot fi comparate cu informațiile disponibile în baza de date despre ADN-ul microorganismelor. Un frotiu PCR prelevat de la femei vă permite, de asemenea, să stabiliți numărul de microbi care sunt prezenți în corpul unei femei.

Cum să faci teste

Tuberculoza este o boală infecțioasă cronică, iar morbiditatea asociată cu această boală are implicații grave asupra sănătății. Boala este răspândită în întreaga lume și tari in curs de dezvoltare incidența este mare. Boala rămâne adesea tăcută sau poate prezenta simptome nespecifice. Ca urmare, prevalența tuberculozei genitale este în mare măsură subestimată.

Suspiciunea ridicată cauzată de investigațiile intensive este esențială pentru diagnosticul bolii. Valorile obișnuite de laborator sunt de mică valoare. Deși nu se poate face un diagnostic absolut din trăsăturile caracteristice unei histerosalpingografii sau ale laparoscopiei, laparoscopia este o procedură valoroasă pentru obținerea de țesut pentru cultură și examen histopatologic.

Această tehnică ajută la selectarea cu precizie a unei metode de tratament, precum și la urmărirea eficacității acesteia.

Ce infecții pot fi detectate printr-un frotiu PCR?

Un număr mare de agenți infecțioși pot fi prezenți în organism, acesta incluzând cei „ascunși” care perioadă lungă de timp ei nu se arată.

Analiza frotiului PCR dezvăluie următoarele infecții:

Cum se efectuează analiza PCR?

Un diagnostic cert poate fi pus printr-o cultură pozitivă a micobacteriilor și prin demonstrarea unei leziuni histopatologice specifice într-o probă. LA anul trecut Metoda reacției în lanț a polimerazei a evoluat ca o metodă utilă și rapidă pentru diagnosticarea tuberculozei pulmonare și extrapulmonare.

Acest studiu a fost realizat la Centrul de Cercetare a Fertilității al Institutului de Obstetrică și Ginecologie din Chennai în colaborare cu Centrul de Cercetare a Tuberculozei din Chennai și a inclus 72 de femei infertile care au fost înscrise timp de 30 de luni. A fost obținută aprobarea comitetului de etică pentru studiu și a fost obținut consimțământul informat de la fiecare pacient.

  • chlamydia tractului genital;
  • hepatită;
  • ureplasmoza organelor genitale;
  • candidoză (afte);
  • micoplasmoza;
  • vaginoza bacteriană;
  • Mononucleoza infectioasa;
  • trichomonaza;
  • infecție cu papiloma virală;
  • herpes;
  • SIDA (HIV);
  • prezența celulelor canceroase;
  • evaluează starea hormonală;

Cum se ia un tampon la femei?

Pentru a face un frotiu pentru PCR, se folosesc diverse materiale biologice (poate fi sânge, saliva, secreții din organele genitale, urină). În laborator, se ia un tampon de la femei din microflora vaginală, colul uterin sau uter. Se ia tamponul:

Eșantionarea a fost efectuată prin metoda convenabilă de eșantionare. În timpul laparoscopiei, au existat semne sugestive pentru tuberculoză, cum ar fi tuberculi sinceri, cazeine, granuloame și tuburi cu margele. Au fost de asemenea examinate dovezi ale unei infecții cronice anterioare sub formă de tuburi îngroșate, cazeinizare intraluminală și hidrosalpinx terminal cu tuburi replici, masă tubo-ovariană și aderențe false în punga de Douglas.

Materialul pentru studiu a fost colectat din endometrul premenstrual și, dacă a fost posibil, sacul de fluid Douglas a fost, de asemenea, aspirat la laparoscopie. În 23 din 72 de cazuri, au fost posibile doar frotiul, cultura și examenul histopatologic. Prin urmare, rezultatele testelor specifice au fost evaluate după criterii clinice doar în aceste 49 de cazuri.

  • la femeile care au avut sex neprotejat,
  • care nu au fost niciodată examinate
  • la femeile care plănuiesc să rămână însărcinate.

Indicațiile pentru un frotiu PCR sunt următoarele:

  • identificarea cauzelor infertilității;
  • prezența ITS în faza acută;
  • sarcina dificila;
  • presupunerea că ITS devin cronice;
  • în cazul în care este necesară identificarea rezistenţei virusului la un anumit tip de antibiotice.

La materialul prelevat se adaugă reactivii necesari, după care se identifică agenții patogeni sau boala. Procedura de luare a materialului nu durează mai mult de 5 minute, este absolut nedureroasă, iar rezultatul său poate fi aflat după 2-4 zile. În funcție de rezultatele sale, tratamentul este prescris.

Cum se ia un tampon la femei?

Prezența granuloamelor de cazeină înconjurate de celule epitelioide, limfocite, plasmocite și celule gigantice a fost diagnosticul de tuberculoză. Pentru cultură, proba de țesut a fost tocată fin cu 5 ml de apă distilată sterilă. Proba a fost centrifugată și supernatantul a fost aruncat.

Metoda reacției în lanț a polimerazei. Pacienții aveau vârste cuprinse între 20 și 35 de ani. Nereguli menstruale precum amenoreea secundară, oligomenoreea și menoragia au fost observate în 18 cazuri. În 42 de cazuri, în afară de infertilitate, nu au existat alte simptome. Trei dintre cele 72 de cazuri au avut un istoric de contact apropiat cu pacienții cu TBC. Un test tuberculină pozitiv a fost observat în 10 cazuri cu o valoare medie de 13 mm. În aceste 10 cazuri, au existat dovezi de tuberculoză în nouă cazuri.

Ce trebuie să știe o femeie înainte de a face un frotiu PCR?

Înainte de a efectua studiul, o femeie trebuie să se pregătească. Deja cu o lună înainte de analiza planificată, este necesar să nu mai folosiți toate medicamenteși proceduri medicale.

Merită luat în considerare faptul că analiza se face înainte de menstruație, sau la 1-4 zile după încheierea acesteia. Cu 3-4 zile înainte de analiză, este necesar să se abțină de la relații intime. De obicei, materialele sunt luate în acele situații în care virusul intră în stadiul acut.

Dovezi de calcificare prin ecografie sau radiografie ale abdomenului au fost observate la cinci femei. Histerosalpingograma a fost efectuată în 59 de cazuri. Caracteristici indicând tuberculoza genitală, cum ar fi o cavitate endometrială distorsionată, cu mărgele aspect tuburi, hidrosalpinx în formă de retortă, zone calcificate și blocuri de porumb au fost observate la 35. Laparoscopia a fost efectuată la toți cei 72 de pacienți, iar rezultatele au fost sugestive pentru tuberculoză la 43.

La examenul histopatologic, cinci din 72 de probe endometriale au fost pozitive pentru tuberculoză. Dintre acești cinci au fost pozitivi prin metode convenționale, unul a fost pozitiv numai prin cultură, doi numai prin histologie și doar doi pacienți au fost atât pentru histologie, cât și pentru cultură.

Caracteristici distinctive ale analizei PCR:

  • precizie ridicată a determinării tipului de infecție;
  • pentru a identifica agentul patogen, chiar și 1 dintre celulele sale este suficientă;
  • capacitatea de a identifica agentul patogen în orice mediu lichid;
  • viteza suficient de mare de determinare a rezultatelor;
  • face posibilă identificarea virusului și nu a deșeurilor sau a anticorpilor acestuia;
  • o metodă care detectează cu acuratețe anumite tipuri de infecții.

În comparație cu alte metode de cercetare, această tehnică dă rezultate mult mai puțin fals negative (arată că nu există nicio infecție, în timp ce este de fapt prezentă), iar cu o precizie de 99,9% nu dă fals - rezultate pozitive(prezența infecției atunci când aceasta nu este prezentă)

Pe baza criteriilor de diagnostic elaborate în acest studiu, 49 de cazuri au fost împărțite în două grupe și au fost evaluate teste de diagnostic. Grupul A a fost format din 28 de cazuri în care a fost suspectată tuberculoză genitală. În grupa A, doi au fost pozitivi la cultură. Sensibilitatea culturii a fost de 14%, iar specificitatea a fost de 100%. A existat acord între criteriile clinice și cultură în ceea ce privește acordul Kappa. În aceste două cazuri, probele au fost retestate și s-a confirmat pozitivitatea.

Cum să înțelegeți rezultatele studiului?

Un frotiu PCR poate fi negativ sau pozitiv.

Un rezultat pozitiv indică faptul că există urme de infecție în materialul biologic colectat și care au fost descărcate.

Un rezultat negativ are sensul opus și înseamnă că în timpul studiului nu au fost găsite urme de infecție în material.

Retestarea a fost efectuată pe 5 din 12 specimene negative și toate s-au dovedit a fi negative. Reeșantionarea este posibilă doar în trei și toate au fost marcate ca negative. În 3% din cazuri, în afară de infertilitate, nu au existat alte simptome. Observații similare au fost făcute de alți autori.

Tulburările menstruale precum amenoreea secundară, oligomenoreea și menoragia au fost observate în 25% din cazuri. Dar, din cauza naturii secundare a tuberculozei genitale, organismele infectante sunt puține ca număr, locul de prelevare poate să nu reprezinte o zonă infectată, iar un loc infectat poate fi ușor ratat. În 50% din cazuri, infecția poate fi limitată la trompele uterine. Mai mult, din cauza proliferării ciclice a endometrului, granuloamele nu au timp suficient pentru a se forma, astfel încât endometrul poate să nu prezinte semne de tuberculoză în toate ciclurile.

Frotiul PCR și sarcina

Dacă s-a întâmplat așa această specie analiză viitoare mamă nu a fost necesar să-l luați, atunci este deja luat de la o femeie însărcinată, deoarece acest studiu ajută la identificarea infecțiilor ascunse care pot fi transmise sexual, precum și a altor infecții ascunse care nu se manifestă mult timp. Ele pot dăuna cu adevărat copilului sau pot duce la avort spontan, infecții intrauterine sau naștere prematură. De aceea este mai bine să faceți această analiză înainte de sarcină, în timpul planificării acesteia, pentru a nu dăuna copilului. Dar dacă se dovedește că femeia este deja însărcinată, nu ar trebui să vă fie frică să faceți testul, deoarece acesta nu afectează copilul. Toate materialele sunt luate de pe suprafața colului uterin sau a canalului cervical.

Proba de biopsie poate fi mică și fluxul sanguin poate fi slab. Din aceste motive, mai multe exemplare trebuie recoltate din mai multe surse pentru a asigura un randament maxim. S-a sugerat că histologia și bacteriologia sunt complementare și nici una nu este complet de încredere. Astfel, s-a ajuns la un acord între rezultatele celor doi primeri în 71% din cazuri.

Pericolul infecției intrauterine și modalități de a o elimina

Fals negativ mare este o limitare importantă în acest studiu. Principiile de medicină internă ale lui Harrison. a 17-a ed. Aspecte anatomice și clinice moderne ale tuberculozei genitale la femei. Tuberculoza genitală feminină și infertilitatea ulterioară. Tuberculoza genitală feminină în Etiopia. Tuberculoza tractului genital feminin la pacienții care frecventează o clinică de infertilitate.

Vă rugăm să activați JavaScript pentru a vizualiza

Frotiu PCR la femei, ce este, de ce este luat și după ce reguli? Acest studiu vă permite să identificați foarte precis agenții cauzali ai diferitelor infecții și vinovații. procese inflamatorii(vulvovaginită). O analiză PCR este luată de la cei care sunt activi sexual și nu au fost niciodată examinați, plănuiesc o sarcină, care au întreținut sex neprotejat, atât femeile cât și bărbații fac frotiu.

Izolarea micobacteriilor din cazurile de infertilitate la femei. Locul laparoscopiei în tuberculoza pelvină la femeile infertile. Tuberculoza genitală în clinica endocrină. Tuberculoza tractului genital feminin. Testul Mantoux pentru diagnosticul tuberculozei genitale la femei.

Cu toate acestea, acest raport a fost doar verificat termene limitate mediu inconjurator. Utilizarea unui vârf de pipetă cu barieră de aerosoli este necesară pentru a preveni contaminarea încrucișată, precum și contaminarea transferată. Prin urmare, manipularea acestor precipitate poate necesita presupuneri, în special în timpul spălării precipitatelor. Unele truse de extracție și purificare disponibile comercial bazate pe protocolul de purificare în fază solidă sunt enumerate în Tabelul 1.

Reacția în lanț a polimerazei, așa este descifrată PCR, face posibilă găsirea informațiilor genetice ale unui agent infecțios într-o cantitate mică de material luat pentru analiză. Cel mai frecvent este frotiul PCR pentru ITS (chlamydia, ureaplasma, micoplasma), apropo, aceleași infecții sunt clasificate ca „ascunse” care nu dau simptome evidente și nu sunt detectate în timpul studiilor obișnuite, de rutină. Infecțiile cu herpes sunt adesea diagnosticate, precum și diferite tipuri de infecții cu papilomavirus uman. în care Atentie speciala se administrează acelor tipuri care provoacă cancer de col uterin, adică oncogen.

Aceste truse elimină nu numai presupunerile, ci și etapele consumatoare de timp de extracție a fenol-cloroformului. Acest lucru este de obicei interpretat ca unul sau ambii amplimeri de oligonucleotide care nu funcționează corect cu șablonul țintă. Acest protocol de detectare oferă, de asemenea, o sensibilitate mai mare decât metoda de detectare a bromurii de etidio, dar necesită pași suplimentari de blotting și hibridizare. Există două tipuri de analize care utilizează citiri în timp real și puncte finale. Această metodă fără gel are câteva alte avantaje față de metodele convenționale cu gel de agaroză.

Un frotiu PCR pentru chlamydia și alte infecții este luat de la viitoarele mame dacă acestea nu l-au luat în timpul planificării copilului. Acest studiu este absolut necesar, deoarece infecțiile latente cu transmitere sexuală pot „sta” în organism mulți ani fără să se arate în niciun fel, dar vor dăuna foarte mult copilului nenăscut, pot duce la avort spontan, naștere prematură și, ca urmare, moartea fetală. Desigur, este mai bine să efectuați tratamentul în etapa de planificare a unui copil, dar dacă diagnosticul PCR al infecțiilor le-a detectat după concepție, nu contează, există medicamente moderne sigure pe care viitoarele mame le pot lua.

Ce arată analiza PCR?

De exemplu, acest sistem poate crește semnificativ debitul. Analiza sondei fluorescente este efectuată într-un format cu 96 de godeuri și mulți dintre pașii de analiză sunt automatizați. Testul este un sistem închis în care tubul de reacție nu este niciodată deschis după amplificare.

S-a demonstrat seroepidemologic că 50 până la 80% din populația adultă este expusă la acest agent patogen. Cu toate acestea, nu au existat rezultate consistente cu agenți patogeni specifici. Prin urmare, dacă protocolul utilizat este suficient de sensibil sau nu nu poate fi evaluat din cauza lipsei de informații în astfel de rapoarte.

Multe femei se tem să facă teste, au auzit și citit suficient pentru a putea orice manipulare „acolo” de către un medic. Și cu atât mai mult, nu puteți lua un frotiu PCR în timpul sarcinii, deoarece materialul este luat din colul uterin și nu de pe suprafața acestuia. Dar nu este înfricoșător. Lungimea colului uterin este destul de mare. Instrumentul nu va intra în uter, nu va afecta în niciun fel copilul. Și nu este necesar să extindeți gâtul pentru a lua biomaterialul. sigur pentru mamă și copil și nedureros.

Unele boli inflamatorii cronice, care nu sunt încă clasificate cu siguranță drept boli autoimune, sunt de asemenea considerate a fi asociate cu anumite infecții microbiene. Cu toate acestea, spre deosebire de bolile infecțioase, microbii potențiali sau contribuitori pentru astfel de cronici boli inflamatorii, inclusiv bolile autoimune, nu pot fi detectate cu ușurință în specimenele obținute dintr-o anumită leziune. Chiar și în astfel de circumstanțe, detectarea consecventă a bacteriilor în probe ar trebui să fie critică în diagnostic și terapie viitoare.

Acest studiu este realizat nu numai pentru a detecta infecțiile cu transmitere sexuală, ci și agenții cauzali ai vaginozei și candidozei bacteriene - gardnerella și ciuperci din genul Candida. Deci, descifrarea unui frotiu pentru diagnosticarea PCR poate fi utilă în astfel de cazuri „banale”.

Pentru a obține un rezultat precis al analizei, mai multe reguli simpleînainte de a-l preda. Pregătirea pentru un frotiu PCR este foarte simplă.
1. Nu puteți urina cu 3 ore înainte de test.
2. Studiul se desfășoară în afara utilizării antibioticelor și agenților antibacterieni.
3. Este mai bine să luați un frotiu la mijlocul ciclului, dar nu chiar înainte de începerea menstruației sau imediat după terminare.
4. Cu 2-3 zile înainte de studiu, nu utilizați contraceptive locale și preparate vaginale.
5. Pentru câteva ore înainte de frotiu, nu vă puteți spăla și duș.
6. viata sexuala trebuie oprit cu cel puțin 1,5 zile înainte de a lua materialul.
7. Livrarea unui frotiu ar trebui să fie ușor amânată dacă au fost prelevate probe colposcopice cu o zi înainte pentru a detecta boli ale colului uterin.

Scleroza multiplă: variații pe o temă. Wertheim-van Dillen și J. Van der Nordaa. O metodă rapidă și simplă de purificare a acizilor nucleici. Prelucrarea tampoanelor cervicale de arhivă pe termen lung pentru detectarea papilomavirusului uman folosind reacția în lanț a polimerazei.

Standardizarea testelor pentru pneumonia cu chlamydia: recomandări de la Centrele pentru Controlul și Prevenirea Bolilor și Centrul de Laborator pentru Controlul Bolilor. Dependența protocoalelor de inactivare a produsului de reacție în lanț a polimerazei de lungimea și compoziția ampliconului.

A contribuit în egală măsură la această lucrare. Fundal. Fiziopatologia schistosomiazei genitale feminine este doar parțial înțeleasă. Rezultate. Pete nisipoase și papule cauciucate au fost găsite la 41 din 118 femei. Papule cauciucate reflectă un răspuns imun celular intens dominat de eozinofile, eroziune epitelială și un ou viabil. A existat o scădere semnificativă a prevalenței papulelor cauciucate odată cu vârsta, chiar și după ajustarea pentru producția de urină din ou. Petele de nisip cu boabe au prezentat un răspuns imun celular moderat și un ou.